何以检“幽”,唯有吹气?
2015/7/27 医学界消化频道

    

     想到幽门螺杆菌(Hp)的检测,大家首先可能想到的会是13C或14C尿素呼气试验,下面这些检测方法你都知道吗?

     来源:医学界消化频道

     作者:浩然

     幽门螺旋杆菌(HP)是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的细菌,其定植于人体的胃黏膜,可以引起各种胃以及十二指肠疾病。1983年首次从慢性活动性胃炎黏膜活检组织中分离成功,是目前所知能够在人胃中生存的惟一微生物种类。Hp病的不良预后是胃癌。因此,幽门螺旋杆菌感染的诊断日益引起重视。

     检测方法

     (1)胃粘膜活检组织病原学检测

     在给患者做胃镜检查时,在胃窦部取活检,活检组织经 H E 或 warthin -Starry 染色镜检,发现呈螺旋状杆菌者即可确诊。此法较简便,但细菌数量少时易漏诊,造成假阴性结果。 故对高度怀疑幽门螺旋杆菌感染者,做微需氧培养或聚合酶 链反应(PCR),可大大提高检出率。

     (2)快速尿素酶试验法

     取0.1 ml改良 Christensen 细菌尿素酶鉴定试剂于平皿圆孔中,再将胃黏膜置于此孔中,试剂由淡黄变淡红色为阳性,不变色为阴性。

     (3)硼酸-美蓝染色法

     将胃黏膜组织甲醛固定后经连续切片,将脱蜡切片放入美蓝染色液染0.5~1 min,流水速洗至染料不会脱色,风干切片,中性数胶封片后在镜下观察,其背景为蓝色,红细胞为绿色,幽门螺旋杆菌为蓝紫色弯曲状物。

     (4)13C或14C尿素呼气试验

     受测者口服人工合成尿素,此尿素含有碳原子13C或14C。受测者幽门螺旋杆菌感染, 细菌可分解外源性的尿素产生氨。受测者口服尿素后半小时内,先后呼三口气,留取样本, 通过同位素检测仪检测,呼气中含有13C或14C为阳性,否则为阴性。此法灵敏度高,患者无痛苦,故已公认为目前检测幽门螺旋杆菌的最佳方法,尤其适用于年老体弱 、幼儿或因其它疾病不能做胃镜检测者。

     (5)基因诊断技术

     基因诊断技术主要包括核酸分子杂交和多聚酶链式反应( PCR)。核酸分子杂交技术具有较高的特异性和敏感性。 如前文所述,原位荧光杂交技术可应用于甲醛固定的组织标本及其药物的抗性的检测。应用针对一般抗原和CagA寡核苷酸探针的原位杂交技术,确定不同部位胃组织中CagA 的表达情况,并且与同一部位多重PCR结果进行比对,二者呈现较好的相关性。

     (6)血清学检查

     采用血的方法检测血清中幽门螺旋杆菌的抗体水平。因为幽门螺旋杆菌感染后,可在体内产生相应的抗体,使检测结果呈现阳性。但是该抗体的产生一般需要数月,因而感染初期作该检测时,检测结果常常会出现假阴性,从而使患者失去最佳治疗时机。此外,即使幽门螺旋杆菌被根除,抗体也往往需要1-2年才能转阴,所以该法假性结果多。

     (7)粪便抗原检测

     粪便标本幽门螺旋杆菌抗原测定新近被提议作为检测幽门螺旋杆菌感染有效的非侵袭性方法,酶联免疫吸附实验(ELISA)商品化试剂已在世界各个地区广泛应用。研究证明,在未经治疗的感染者中,粪便抗原的检测与其他确认试验具有较好的一致性,其敏感性、特异性、阳性和阴性预告值分别为98%,100%,100%和96.5%。

     在临床检测中,一般对确诊幽门螺旋杆菌感染,须两种或两种以上的方法均呈阳性。

     参考文献:

     1: 李晓波,刘文忠。 幽门螺旋杆菌常用诊断方法的比较。中华消化杂志,2002,11:691- 693

     2: De Carvalho Costa Cardinali L, Rocha GA, Rocha AM, et al. Evaluation of 13C-urea breath test and Helicobacter pylori stool antigen test for diagnosis of H. pylori infection in children from a developing country. J Clin Microbiol, 2003, 41: 3334- 3335.

     3: Kivi M, Tindberg Y, Bengtsson C, et al. Assessment of the cag pathogenicity island status of Helicobacter pylori infections with serology and PCR. Clin Microbiol Infect, 2005, 11: 66- 68.

     4: [8] 梁景云。幽门螺杆菌抗体检测的临床意义。中国当代医药,2010,17 (25): 83.

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