科学家发现肾癌预后监测和靶向治疗的新型表观标记物
2015/12/28 中科院之声

     透明肾细胞癌( clear cell Renal Cell Carcinoma , ccRCC )是肾癌中最常见的亚型，90%以上的 ccRCC 患者中 VHL 抑癌基因是失活的，但在小鼠实验中却发现该基因的缺失并未能引起透明细胞癌形成，这意味着还存在其他的致瘤机制。近些年的研究发现，与肾癌发生发展、患者总体生存率以及预后相关的基因突变主要集中在表观调控因子上，这表明表观遗传变异对肾癌的发生发展起到了重要的作用。长期以来由于技术的限制，以前研究观察到的全基因组甲基化修饰包含了5-甲基胞嘧啶( 5 - mC )和5-羟甲基胞嘧啶( 5 - hmC )两部分修饰的总和，并不知道它们各自真实的修饰水平、相互调控关系及其生物学意义。

     近日，中国科学院北京基因组研究所精准基因组医学重点实验室慈维敏课题组、基因组科学与信息重点实验室刘江课题组同北京大学第一医院周利群课题组合作，在单碱基水平探究了 5mC 和 5hmC 在 ccRCC 中的重编程模式和规律，发现 5hmC 在肾癌发生中可能的驱动作用以及 5hmC 可作为肾癌潜在的预后标记物。该研究结果已在近期的 Cell Research 杂志在线发表。

     研究团队首先通过质谱、原发肿瘤组织芯片以及免疫组化染色分析发现了与以往研究不同的结果：同癌旁组织相比，肾癌样品中 5mC 的总体水平并没有显著变化，而 5hmC 在全基因组上的修饰则几乎在所有肿瘤患者中呈现一致的显著下调。进一步关联了 5hmC 和 5mC 的动态规律及临床信息后发现， 5hmC 水平可以作为独立因子预测患者的总体生存期： 5hmC 水平越低，患者的生存期越短。

     研究团队还通过整合重亚硫酸盐测序( BS - Seq )和 Tet 氧化辅助的重亚硫酸盐测序( TAB - seq )分析，克服了以往大多数研究只关注启动子区域的甲基化状态，以及广泛使用的 BS - Seq 方法不能区分 5mC 和 5hmC 等局限，获得了单碱基分辨率的 5mC 和 5hmC 真实修饰水平的全基因组图谱，结果发现在肾癌发生过程中 5hmC 重编程被抑制，导致肾癌细胞中存在广泛的基因体区超甲基化。进一步研究还发现，基因体区的甲基化修饰同一些基因的沉默有显著关联。据推测， 5mC 或者 5hmC 在基因体区的改变可能是通过类似 mRNA 剪切的方式来调控基因表达的，但其具体功能还需深入研究。而在裸鼠模型实验中回调 5hmC 水平，发现可以减慢肿瘤细胞的侵袭性，抑制肿瘤生长。

     该项研究不但清晰阐明了肾癌发生过程中 5mC 真实重编程规律，并阐明了 5hmC 重编程参与肾癌特异的 DNA 甲基化图谱形成。结合临床数据也提示， 5hmC 水平降低而非 5mC 水平降低是肾癌更敏感的预后表观标记物，而裸鼠实验中 5hmC 的回调抑制了肿瘤的生长也说明了 5hmC 在肾癌中的重编程不是一种伴随现象，更有可能是一种驱动力。该研究通过探索肾癌中 5mC 和 5hmC 重编程的动态变化规律，暗示 5hmC 可以作为肾癌预后监测的新型表观遗传标记物和靶向治疗的靶点。

     该项研究得到重大基础研究项目和国家自然科学基金等项目的支持。

    

     两种测序方案的区别与结合。左半部分： BS - seq 结果包含 5hmC 和 5mC ；肾癌呈现整体低甲基化趋势。右半部分： TAB - seq 确定 5hmC ；结合 BS - seq ，确定 5mC ；获得全基因组范围内单碱基精度的甲基化图谱；发现肾癌呈现整体高甲基化趋势；且主要体现在 gene body 区域。

     来源：中国科学院北京基因组研究所

    

    

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